thumb|250px|Potkovičasti inhibitor ribonukleaze(prikazan kao plameni okvir) u interakciji protein-protein sa ribonukleaznim proteinaom. Kontakti između dva proteina su prikazani kao obojene mrlje. mini|desno|300px| Glioksalaza I čovjeka.Dva iona cinka koji su potrebni za funkciju enzima, prikazani su kao ljubičaste kuglice. Inhibitor enzima S-heksiglutation je prikazan kao prostorno-popunjavajući modul, u dva aktivna mjesta.
Definicija Interakcije protein–protein (IPP) se odnose na trajne i specifične fizički uspostavljene kontakte između dva ili više proteina kao rezultata biohemijskih događaja i / ili elektrostatskih sila. Obično se shvataju kao fizički kontakti sa molekulskim priključenjima između proteina koji se javljaju u ćeliji ili u živim organizmima u specifičnim biomolekulskim kontekstima (De Las Rivas J. i Fontanillo C., 2010.).
Način djelovanja Proteini rijetko djeluju sami. Mnogi molekulski procesi u ćeliji obavljaju molekulski mehanizmi koji se sastoje od velikog broja komponenti proteina u organizaciji njihove IPP. Ove interakcije su važne za interakcijski sistem žive ćelij, a nenormalni IPP su osnova više bolesti, kao što su Creutzfeldt-Jakobova i Alzheimerova bolest i rak.Alberts B. (2002)ː Molecular biology of the cell Garland Science, New York, .Lindhorst T. (2007): Essentials of carbohydrate chemistry and biochemistry. Wiley-VCH, 3527315284}}Robyt F. (1997): Essentials of carbohydrate chemistry. Springer, .Voet D., Voet J. (1995): Biochemistry, 2nd Ed. Wiley, http://www.wiley.com/college/math/chem/cg/sales/voet.html.Laidler K. J. (1978): Physical chemistry with biological applications. Benjamin/Cummings, Menlo Park, .Bajrović K, Jevrić-Čaušević A., Hadžiselimović R., Ed. (2005): Uvod u genetičko inženjerstvo i biotehnologiju. Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju (INGEB), Sarajevo, .
IPP su proučavani iz različitih perspektiva, kao što su:biohemije, kvantna hemija, molekulska dinamika, signali, između ostalog. Sve ove informacije omogućuje stvaranje velikih interakcija mrežolike proteinske lično metabolitske ili genetičke / epigenetičke mreže – da osnaži dosadašnja saznanjima o biohemijskim kaskadama i patogenezi bolesti, kao i pružanja novih terapijskih ciljeva.
Primjeri interakcija protein–protein Signalna transdukcija Aktivnost ćelije je regulirana vanćelijskim signalima. Signalna propagacija unutra i / ili uz unutrašnjost ćelija ovisi o PPI između različitih signalnih molekula. Ovaj proces, nazvan signalni, ima ključnu ulogu u mnogim biološkim procesima i kod mnogih bolesti (npr Parkinsonova bolest i rak). Transport kroz membrane Protein može nositi još jedan protein (naprimjer, iz citoplazme u ćelijsko jedro ili obrnuto, u slučaju mportina jedrovih pora). Ćelijski metabolizam U mnogim procesima, biosintetskih enzimi komuniciraju jedni s drugima za proizvodnju malih spojeva ili drugih makromolekula.
Mišićna kontrakcija Fiziologija mišićne kontrakcije uključuje nekoliko interakcija. Miozinska vlakna djeluju kao molekulski motori i vezivanjem za aktin omogućuju klizanje filamenta. Osim toga, članovi skeletne muskulature, lipidne kapljice povezane sa proteinima porodice sudjelatnika s drugim proteinima, kao aktivator masnog triglicerida lipaze i njegove koactivatorski komparativni identifikacijski-58 gen, za reguliranje lipolize u skeletnim mišićima.
Priroda interakcije Kao što u strukturi proteina dominiraju snage privlačnosti između podjedinica kompleksa proteina koji imaju hidrofobne interakcije, tako djeluju i van der Waalsove sile, vodikove veze i ionske sile između bočnih lanaca u aminokiselinama, koji čine svaki protein.
Metodi istraživanja interakcije protein-protein medium|thumb|500px|NMR struktura citohroma C u ilustraciji njegove dinamike u rastvoru
mini|300px|Klistalna struktura modificiranog gramicidina S određenog horizontalno primjenom kristalografije X- zrakama.
Budući da su interakcije proteina toliko važne, postoji mnoštvo metoda njihovog otkri vanja. .Brettner L. M., Masel J. (2012): Protein stickiness, rather than number of functional protein-protein interactions, predicts expression noise and plasticity in yeast. BMC Systems Biology, 6: 128. Svaki od raspoloživih pristupa ima svoje prednosti i mahane, posebno u pogledu osjetljivosti i specifičnosti metoda. Visoka osjetljivost znači da su mnoge od interakcija koje se javljaju zapravo otkrivene određenim metodom, dok visoku specifičnost ukazuje na to da je većina otkrivenih interakcija stvarno I javljaju, uz nekoliko lažno pozitivnih nalaza.
Imunoprecipitacija se smatra najboljim testom za otkrivanje interakcija protein-protein, pogotovo kada se izvodi sa endogenim proteinima (prekomjerno eksprimiranim ili označenim). Protein od interesa se izolira prema odgovoru na određena antitijela. Molekule koje u interakciji s proteinima, kao što je ispoljavaju se u testu koji je poznat kao Western blot. Dvohibridni test kvasaca istražuje interakcije inventivnih fuzija proteina u jedru kvasca. Ovaj metod može identificirati molekule koje se nedvosmisleno vezuju za dati protein. Međutim, oj metod ima značajnu stopu lažno pozitivnog nalaza, što nalaže potrebu za provjeru interakcije po ko-imuniprecipitacijskom testu. Pročišćavanje tandemskog afiniteta (TAP) otkriva interakcija u realnom ćelijskom okruženju (npr. u citosolu sisara). Ovo je velika prednost u odnosu na dvohibridni test. Glavni nedostatak je da je pročišćavanje proteina sa po dva pranja, tako da ne može otkriti prolazne interakcije protein-protein. Kvantitativna imuniprecipitacija u kombinaciji sa knok-out laboratorijskim miševima se temelji na komunoprecipitaciji, kvantitativnoj masenoj spektrometriji (SILAC) i RNK interferenciji (RNK interferencija - RNAi). Ovaj metod otkriva interakcija između označenih endogenih proteina, tako da ima istu pouzdanost kao komuniprecipitacijska, ali i ovisi o raspoloživosti odgovarajućih antitijela.
Otkriva interakcije u realnom ćelijskom okruženju (kao u citosolu sisara, npr.). Ovo je velika prednost u odnosu na dvohibridni test. Glavni nedostatak je da je pročišćavanje proteina je po dva pranja, tako da ne može otkriti prolazne interakcije protein-protein.
Dvojna polarizacijska interferometrija(IPR) se može koristiti za mjerenje interakcije protein-protein. Daje mjere veličine molekula, gustoće i mase, u realnom vremenu i uz visoke rezolucije. Matični gelovi (Blue Native: BN-PAGE) metod se zasniva na migraciji proteinskog kompleksa na poliakrilamidnim gelovima u skladu sa svojom molekulskom težinom. Jer migracija je također definirana opterećenjem, a koristi se katodni pufer koji sadrži ‘’Coomassie’’ plavilo, što daje neto negativni naboj na proteine bez denaturacije ili prekidanja interakcije s drugim proteinima. Druga dimenzija u denaturisanju SDS-PAGE gelova je da mogu odvojiti spotove i nakon toga identificirati podjedinice kompleksa komponenti, primjeno masene spektrometrije.Voet D., Voet J. G. (2005). Biochemistry, 3rd Ed. Wiley. .
Mreža interakcija protein-protein Stvaranje vizualnih alata za predstavljanje mreža interakcija između proteina je popularna primjena računarske grafike. Iako su dijagrami interakcije proteina uobičajeni u udžbenicima, nisu, zbog svoje kompleksnosti, tako uobičajeni u istraživačkim dijagramima potpunog predstavljaja mreže interakcija između proteina. Karta kontrole ćelijskog ciklusa, koju je uradio Kurt Kohn (1999) je primjer molekulske interakcije mreže, koja je rađena “ručno.Mol Biol Cell. 1999 . Na mapi, Kohn, Schwikowski, Uetz, i Fields (2000) su objavili članak o interakciji protein-protein u kvasca, kombinirajući 1548 proteina određenih dvohibridno, koristeći Sugiyama grafikon crtanja algoritma s automatskim generiratanjem mrežne slike.Nature 2000. Od tada, razvijeni su drugi sistemi za automatizaciju stvaranja mreže interakcija između proteina, uključujući. Osprey VisANT NAViGaTOR Cytoscape To je otvoren softverski alat za kreiranje grafike u molekulskoj interakciji i integraciji sa profilima ekspresije gena i drugim podacima, kod. yEd je moćan grafički uređivač. Može koristiti za izgradnju grafikona, a automatski dizajnira različite vrste dijagrama i mreža. NetPro
Mnoge od gore prikazanh baza podataka o interakcija između proteina, sadrže alate za pomoć korisnicima upravljanja podacima.
Baze podataka o interakciji proteina BioGrid je javni katalog interakcija između proteina i njihove genetike.http://thebiogrid.org/|título=thebiogrid.org|año=2013|fechaacceso=31. HPRD Human Protein Reference Database The MIPS Mammalian Protein-Protein Interaction Database IntAct Interaction Database APID Agile Protein Interaction DataAnalyzer Database of Interacting Proteins ,
Također pogledajte Protein Mišić Reference
Vanjski linkovi
https://web.archive.org/web/20070911065858/http://www.chem.upenn.edu/chem/research/faculty.php?browse=V. Protéines et enzymes. http://www.pnas.org/cgi/content/abstract/105/19/6959?etoc , Estimating the size
http://www.chemdiv.com/portfolio/library-of-modulator-of-protein-protein-interactions-ppi/
http://www.mdpi.com/.
Kategorija:Proteomika Kategorija:Transdukcija signala Kategorija:Biofizika Kategorija:Sistemska biologija Kategorija:Bioinformatika Kategorija:Biotehnologija Kategorija:Proteini