CXorf26 (otvoreni okvir čitanja 26 hromosoma X), znan i kao MGC874,je konzervirani ljudski gen, nađen na plus lancu kratkog kraka X hromozoma. Tačna funkcija gena slabo je znana, ali domen biosinteze polisaharida koji obuhvata veći dio proteinskog proizvoda (poznat kao UPF0368), kao i homolog kvasca, YPL225, daju uvid u njegovu moguću funkciju.
Predložena funkcija S obzirom na masu podataka dostupnih za CXorf26, potencijalna funkcija je vjerovatno povezana s djelovanjem RNK-polimeraze II, ubikvitinacije ribosoma u citoplazmi. Osnova ovih argumenata je u podacima o interakciji ljudskog CXorf26, kao i njegovog kvaščvog homologa, YPL225W. Oba homologa imaju interakciju s višestruko prisutnim proteinima, kao i transkripcijskim enzimom RNK-polimeraza II. Naprimjer, ubikvitinacija i naknadna degradacija proteasoma 26S ima važnu funkciju u regulaciji transkripcije kod eukariota. Protein kvasca, RPN11, koji komunicira s YPL225W, ima homolog kod ljudi, metaloproteazna komponenta 26S proteasoma, koja također razgrađuje proteine ciljane na uništavanje ubikvitinskim putem. Izgleda da se ove funkcije ne odnose na funkciju biosinteze polisaharida, kao što bi se pretpostavljalo zbog njegog konzerviranog domena, ali svejedno može imati ulogu u sekundarnoj strukturi ili mjestima fosforilacije.
Dalje eksperimentiranje potencijalne uloge CXorf26 može dati bolji uvid u njegovu tačnu funkciju u ovim ključnim ćelijskim procesima. Eksperimenti poput inhibitora RNK polimeraze II i naknadne ekspresije gena CXorf26 mogli bi prosvijetliti potencijalnu funkciju, kao i potpuno izbacivanje YPL225W u kvascu, koristeći metode poput RNKi.
Gen thumb|280px|Gensko susjedstvo oko CXorf26. Crne strelice udesno označavaju one gene na pozitivnom lancu X hromosoma, sive strelice – gene na negativnom lancu CXorf26 nalazi se na plus lancu kratkog kraka X hromosoma, posebno na genskom lokusu Xq13.3, koji obuhvata genomsku hromozomsku regiju iz baza 75,393.420 – 75,397.740. Primarna sekvenca transkripta iRNK ima 1214 baznih parova, a njegov proteinski proizvod UPF0368 sastoji se od 233 aminokiseline i ima predviđenu masu od 26,057 Da. Lokus u kojem se nalazi CXorf26, Xq13.3, ima poznate asocijacije sa X-vezanom mentalnom retardacijom.Aceview Gene Annotation
Treći gen koji se nalazi uzvodno od CXorf26 je ATRX, koji kodira domen ATPaze/helikaze, a kada mutira, uzrokuje sindrom X-vezane mentalne retardacije, zajedno sa sindromom alfa talasemije; poznato je da oba izazivaju promjene u obrascima metilacije DNK. Nadalje, treći gen nizvodno od CXorf26, ZDHHC15, koji kada mutira, izaziva X-vezanu mentalnu retardaciju tip 91. Jedan vrijedan gen koji se nalazi u blizini je Xist, ima ulogu u procesu inaktivacije hromosoma X. Inaktivacija se odnosi na CXorf26 i o njoj se govori u nastavku u relevantnom dijelu istraživanja.
Expresija
thumb|280px|Nivoi ekspresije CXorf26 u uobičajenim ljudskim tkivima, prema GEO profilima iz NCBI Podaci o ekspresiji CXorf26 pokazuju da se posvuda eksprimira u ljudskim tkivima i EST u gotovo svim situacijama. GEO profil s desne strane pokazuje nivoe ekspresije za CXorf26 u uobičajenim ljudskim tkivima kako bi se konstantno kretao oko opsega 75. percentila, što sugerira da može imati funkciju domaćina zbog naizgled sveprisutnog ispoljavanja. Ako konzervirani domen zaista ima ulogu u biosintezi polisaharida neke vrste, ova visoka ekspresija gena osjetljiva je na tu funkciju.
thumb|280px|Ekspresija CXorf26 znatno opada kada je CLDN1 prekomjerno izražen, što sugerira odnos između CXorf26 i ćelijske površine, kako predviđa njegov domen biosinteze polisaharida Profili ekspresije gena u repozitoriju Gene Expression Omnibus (GEO) koji se nalazi na web lokaciji NCBI pokazali su da nije bilo mnogo tretmana koji su rezultirali promjenom ekspresije CXorf26 u ispitivanim tkivima. Međutim, jedan eksperiment uporedio je ekspresiju CXorf26 u ćelijama plućnog adenokarcinoma CL1-5, bilo prekomerno ili premalo eksprimirajuće klaudin-1. Rezultati su pokazali da ekspresija CXorf26 jako opada kada je CLDN1 prekomjerno izražen. NCBI GEO Profile GDS3510: Claudin-1 overexpression effect on lung adenocarcinoma cell line CLDN1 je glavna komponenta u formiranju kompleksa uskog spoja između ćelija, koji podstiču adheziju ćelija-ćelija preko ćelijske membrane. Mnogo čvršće međućelijske veze formirani od CLDN1 vjerovatno bi rezultirali smanjenom ekspresijom CXorf26, jer bi se ćelijska membrana koristila za uske spojeve umjesto normalne funkcije povezane s heparan-sulfatom.
Alternativni oblici prerade
thumb|280px|Alternativni oblik prerade ljudskog transkripta CXorf26. Alternativnom obliku prerade, prikazanom crvenom bojom, nedostaje egzon 5, ali je vjerovatno dodan na originalni egzon 6. Postoji samo jedan oblik alternativne prerade CXorf26. Ovaj spojni oblik ima znatno manje parova baza iRNK na 977, ali još uvijek ima proteinski proizvod od 232 aminokiseline.[Ensembl Genome Browser http://useast.ensembl.org/Homo_sapiens/Gene/Summary?g=ENSG00000102390;r=X:75392771-75398039 ] Izgleda da ovom alternativnom obrascu prerade nedostaje egzon 5 transkripta, ali može se dodati na egzon 6, stvarajući veći egzon u odnosu na konsenzusni transkript.
Kada je u pretraživanju dodano 3.000 baznih parova s obje strane, nije bilo drugih predviđenih egzona unutar genomske sekvence CXorf26-
Regija promotora
Predviđa se da se promotor za CXorf26 nalazi od 75392235. do 75393075. baze na pozitivnom lancu hromosoma X.Genomatix: Eldorado Genome Annotation and Browser [www.genomatix.de] Područje promotora ima veliku konzerviranu regiju kod svih primata i većini homologa sisara, ali je smanjeno kod udaljenijih vrsta. S obzirom na to da primarni transkript započinje u osnovi 7539277., promotor se s njim preklapa za 304 baze. Prikupljeno je i 20 predviđenih mjesta vezanja transkripcijskih faktora sa njihovom porodicom. Velika količina faktora transkripcije odnosi se na faktore cinkovih prstiju, koji imaju funkciju stabilizacije nabora proteina, dok se čini da se nijedan od faktora ne odnosi na potencijalnu funkciju biosinteze polisaharida. Jedna porodica transkripcijskih faktora za koju se predviđa da će se vezati za promotorsku regiju bila je V $ CHRF i uključena je u regulaciju ćelijskog ciklusa. Propis bi se mogao odnositi na funkciju ubikvitina; utvrđeno je da proteini s funkcijom tipa ubikvitina komuniciraju s CXorf26.
Protein
Subćelijska distribucija
Vjerovatnoća da će protein CXorf26 biti lokaliziran u citoplazmi je 56,5% dok je 17,4% vjerovatno da će se lokalizirati u mitohondrije. Homolog kvasca CXorf26, YPL225W, označen je kao GFP i utvrđeno je da je njegovo mjesto u citoplazmi. Podržana je lokacija citoplazme umjesto transmembranske, jer nema hidrofobne signalne sekvence peptida i TMAP, koji nije predvidio potencijalne transmembranske segmente u CXorf26 ili bilo kojem od njegovih homologa u drugim vrstama.
Polisaharidni domen
thumb|280px| Sažetak karakteristika sekvence proteina Cxorf26, sa konzerviranim domenom biosinteze polisaharida označenim zelenom bojom Utvrđeno je da CXorf26 u svojoj sekvenci ima konzervirani domen, poznat kao DUF757. NCBI BLAST Assembled RefSeq Genomes Konzervirani domen obuhvata većinu proteinske sekvence, od aminokiseline 39 do 159. Konzervirani domeni snažno su ispoljani u svim upoređenim homolozima, uključujući sisare, beskičmenjake, kao što su insekti, pa čak i spužve. Homolozi kvasaca, YPL225W, pokazuje 42,4% identiteta i 62% sličnosti u ovoj domeni. Očuvanje domene posebno je visoko su u područjima koja uključuju jedan od višestrukih alfa-heliksa ili beta-listova. Također postoje višestruko konzervirana mjesta fosforilacije, u aminokiselinskoj sekvenci na tirozinu 72 i serinu 126.
Prema NCBI,NCBI Conserved Domain Database ovaj domen je u PF04669 porodici proteina za koju se očekuje da ima ulogu u biosintezi ksilana u zidovima biljnih ćelija, ali njena tačna uloga u putu sinteze nije poznata. Kako životinjske ćelije ne sadrže ćelijske zidove, njegova tačna funkcija u drugim organizmima, poput ljudi, nije poznata.
Ksilan je napravljen od jedinica pentoznog šećera ksiloze, koji je poznat po tome što je prvi saharid u više biosintetskih puteva anionskih polisaharida kao što su heparan-sulfat i hondroitin-sulfat. Kao i ksilan, i heparan-sulfat nalazi se na ćelijskoj površini budući da je potreban i za površinu ćelije i za vanćelijski matriks, to može objasniti visoku ekspresiju CXorf26 u gotovo svim ljudskim tkivima. Biosinteza heparana odvijs se u lumenu endoplazmatskog retikuluma a iniciran je prijenosom ksiloze iz UDP-ksiloze, pomoću ksiloziltransferaze na specifične ostatke serina unutar proteinskog jezgra. PSORTII predviđa prisustvo motiva sličnog KKXX-u, GEKA, u blizini C-kraja CXorf26. Motivi slični KKXX-u predviđaju se u signalima endoplazmatskog retikuluma za zadržavanje membrane. Ovaj motiv konerviran je samo kod primata. Međutim, utvrđeno je da na kraju domena postoji još jedan motiv sličan KKXX-u, QDKE. K u ovom motivu je vrlo konzerviran kod većine beskičmenjaka. Međutim, kontradiktorni rezultati NetNGlyc-a predviđaju da nema mjesta N-glikozilacije, sugerirajući da CXorf26 ne prolazi posebno presavijanje u lumenu endoplazmatskog retikuluma. S obzirom na to da konzervirani domen ne može funkcionirati za stvaranje ksilana, jer u životinjskim ćelijama nema ćelijskih zidova, funkcija može biti povezana s tim putem.
Sekundarna struktura Predviđanja u više programa, kod CXorf26 sugeriraju prisustvo sedam alfa-heliksa i dva beta-lista; većina sekundarnih struktura je u konzerviranom domenu. Eksperimentalni dokazi u domenu polisaharida, u homologu kvasca pokazuju četiri alfa-heliksa i dva beta-lista,[A Novel Solution NMR Structure of Protein yst0336 from Saccharomyces cerevisiae https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/mmdb/mmdbsrv.cgi?uid=61478&Dopt=s] baš kao što predviđeni SWISS model pokazuje za ljude. Položaj sekundarnih struktura je također je konzerviran.
Post-translacijske modifikacije
Pepsin (pH 1,3), Asp-N endopeptidaza, N-terminalni glutamat i proteinaza K imali su 50 ili više mjesta cijepanja unutar proteina, ali to nije imala nijedna od 10 kaspaza.[ExPASy Tools: Peptide Cutter http : //expasy.org/tools/] To sugerira da, tokom apoptoze, CXorf26 vjerovatno neće biti odcijepljen ili degradiran. Ovo slijedi uz zapažanje da je CXorf26 izrazito eksprimiran u gotovo svim tkivima i eksperimentalnim uslovima.
Lizin 63 i 66 su potencijalna mjesta glikacije epsilon amino grupa lizina. Lizin 63 je konzerviran i u Macaca mulatta i u Bombus impatiens. Postoji 10 serinskih, tri treoninska i šest tirozinskih mjesta fosforilacije predviđenih unutar proteina CXorf26. Kada se porede predviđena mjesta fosforilacije, ona koja su prikazana u donjoj tabeli bila su ona koja su konzervirana u Macaca mulatta kao i Bombus impatiens. S127 je ostao u tabeli iako Homo sapiens i Macaca mulatta nisu imali značajne procjene iznad praga za tu poziciju. Evolucijskom promjenom, serina u bombusu promijenjen je u tirozin kod Homo sapiens i Macaca mulatta, koji je još uvijek sposoban za fosforilaciju. To sugerira da, iako je postojala mutacija, to vjerovatno ne bi rezultiralo velikom promjenom proteina i njegove funkcije Bombus impatiens Homo sapiens & Macaca mulatta Serin 20 Serin 23 Serin 91 Serin 94 Tirozin 69 Tirozin 72 Tirozin 126 Tirozin 129 Serin 127* Tirozin 130*
Zastupljenost po vrstama