CoA ligaza ACSBG2 dugolančane masne kiseline je enzim koji je kod ljudi kodiran genom ACSBG2.

Aminokiselinski sastav kodiranog proteina Simboli

C: Cistein D: Asparaginska kiselina E: Glutaminska kiselina F: Fenilalanin G: Glicin H: Histidin I: Izoleucin K: Lizin L: Leucin M: Metionin N: Asparagin P: Prolin Q: Glutamin R: Arginin S: Serin T: Treonin V: Valin W: Triptofan Y: Tirozin

1020304050 MTGTPKTQEGAKDLEVDMNKTEVTPRLWTTCRDGEVLLRLSKHGPGHETP MTIPEFFRESVNRFGTYPALASKNGKKWEILNFNQYYEACRKAAKSLIKL GLERFHGVGILGFNSAEWFITAVGAILAGGLCVGIYATNSAEVCQYVITH AKVNILLVENDQQLQKILSIPQSSLEPLKAIIQYRLPMKKNNNLYSWDDF MELGRSIPDTQLEQVIESQKANQCAVLIYTSGTTGIPKGVMLSHDNITWI AGAVTKDFKLTDKHETVVSYLPLSHIAAQMMDIWVPIKIGALTYFAQADA

LKGTLVSTLKEVKPTVFIGVPQIWEKIHEMVKKNSAKSMGLKKKAFVWAR NIGFKVNSKKMLGKYNTPVSYRMAKTLVFSKVKTSLGLDHCHSFISGTAP LNQETAEFFLSLDIPIGELYGLSESSGPHTISNQNNYRLLSCGKILTGCK NMLFQQNKDGIGEICLWGRHIFMGYLESETETTEAIDDEGWLHSGDLGQL DGLGFLYVTGHIKEILITAGGENVPPIPVETLVKKKIPIISNAMLVGDKL KFLSMLLTLKCEMNQMSGEPLDKLNFEAINFCRGLGSQASTVTEIVKQQD PLVYKAIQQGINAVNQEAMNNAQRIEKWVILEKDFSIYGGELGPMMKLKR HFVAQKYKKQIDHMYH

Kloniranje i ekspresija Profiliranjem ekspresije za identifikaciju gena različito eksprimiranih između testisa fetusa i odraslog čovjeka, nakon čega slijedi analiza baze podataka, Zheng et al. (2005) identificirali su šest alternativno prerađenih varijanti ACSBG2. Varijante se uglavnom razlikuju u preradi prvih sedam egzona, s tim da su u većini varijanti uključeni egzoni 8 do 16. Protein pune dužine, koji je kodiran u tri prerađene varijante, sadrži 666 aminokiselina. RT-PCR korištenjem prajmera smještenih u zajedničkom području šest varijanti otkrivena je ekspresija ACSBG2 u testisima, gušterači, srcu, plućima, jetri, bubrezima, tankom i debelom crijevu. Koristeći specifične prajmere RT-PCR pokazano je da je jedna varijanta, koja kodira protein od 479 aminokiselina, posebno eksprimirana u testisima, kao i u ljudskim Leydigovim ćelijama. Ekspresija ovog transkripta bila je 50 puta veća u testisima odraslih nego u embriona. Pretragom baza podataka za sekvence slične ACSBG1 (614362), nakon čega slijedi PCR biblioteka cDNK testisa, Pei et al. (2006) klonirali su ACSBG2. Izvedeni protein od 666 aminokiselina ima izračunatu molekulsku masu od 74,4 kD i dijeli 50% identiteta s ACSBG1. ACSBG2 sadrži domen koja veže AMP, drugu konzerviranu regiju u acetil-CoA sintetazama, dva potencijalna mjesta N-glikozilacije i potencijalni transmembranski domen. AMP-vezujući domen ACSBG2 ima histidin (his511), umjesto visoko konzerviranog arginina koji se nalazi u drugim acetil-CoA sintetazama. Pacovski i mišji ACSBG1, koji sadrže po 667 aminokiselina, takođe imaju arginin na homolognom položaju u domenu koji veže AMP. Tačkasta analiza ljudskih tkiva pokazala je ekspresiju ACSBG1 samo u testisima. Analiza Southern i Western blota miševa otkrila je iRNK i protein ACSBG2 u testisima, meduli i kičmenoj moždini.

Hibridizacija in situ mišjeg testisa pokazala je ekspresiju Acsbg2 uglavnom u Sertolijevim ćelijama. Histohemijskim ispitivanjem moždanog stabla i kičmene moždine miša otkrivena je lokalizacija Acsbg2 u velikim motornim neuronima medulske mrežaste formacije i podjezičnog jezgra, u nekim motornim neuronima u prednjem i stražnjem rogu vratne i u nekoliko ćelija grudne kičmene moždine. Western blot analiza frakcionisanog mišjeg testisa otkrila je Acsbg2 uglavnom u mikrosomskoj frakciji, s tim da je neki Acsbg2 bio u citosolu. Ekspresija mišjeg ili humanog ACSBG2 u staničnim linijama rezultirala je pretežno citoplazmatskim proteinom.

Funkcija gena Koristeći RT-PCR, Zheng et al. (2005) pokazali su da je ekspresija varijante ACSBG2specifične za testis smanjena u testisima neplodnih muškaraca sa sindromom samo Sertolijevih ćelija ili drugim oblicima azoospermije.Zheng, Y., Zhou, Z.-M., Min, X., Li, J.-M., Sha, J.-H. Identification and characterization of the BGR-like gene with a potential role in human testicular development/spermatogenesis. Asian J. Androl. 7: 21-32, 2005. PubMed: 15685348

Koristeći biohemijsku analizu in vitro, Pei et al. (2006) pokazali su da je ACSBG2 eksprimiran u COS-1 ćelijama koristio oleinsku (C18: 1, omega-9) i linolnu kiselinu (C18: 2, omega-6) kao supstrate za sintezu acil-CoA. Nije otkrivena značajnija aktivnost kod ostalih testiranih podloga. ACSBG2 pokazao je pH optimum od pH 6,5, sa nižim sekundarnim maksimumima pri pH 7,5. Dobivena mutacija his511 na arg je monofazni pH optimum, između pH 7,0 i 7,5, sličan onome koji je pokazao divlji tip miša Acsbg2, bez promjene u preferenciji supstrata. Pei et al. (2006) zaključili su da ljudska specifična supstitucija arg511 sa njegovom utiče na katalitsku efikasnost enzimaPei, Z., Jia, Z., Watkins, P. A. The second member of the human and murine 'bubblegum' family is a testis- and brainstem-specific acyl-CoA synthetase. J. Biol. Chem. 281: 6632-6641, 2006. [PubMed: 16371355Watkins, P. A., Maiguel, D., Jia, Z., Pevsner, J. Evidence for 26 distinct acyl-coenzyme A synthetase genes in the human genome. J. Lipid Res. 48: 2736-2750, 2007. PubMed: 17762044

Zheng et al. (2005) utvrdili su da gen ACSBG2 sadrži 16 egzona i obuhvata 57,4 kb.

Reference

Vanjski linkovi

Dopunska literatura

Kategorija:Ljudski proteini Kategorija:Geni na hromosomu 19