náhled|212x212pixelů|Klon adherentní buněčné linie 3T3-L1. Buňky jsou charakteristické svým protáhlým tvarem s dvěma úpony. Buněčná linie 3T3-L1 je myší buněčná linie preadipocytů adherentního typu. Izolace této buněčné linie spočívala v klonování myších 3T3-L1 embryonálních fibroblastů, které ve velké míře akumulovaly lipidy ve formě tukových kapének. Tato linie je vysoce využívaná ve studiu molekulární biologie. náhled|Červené tukové kapénky produkované 3T3-L1 adipocyty obarvené roztokem Oil Red O.
Kultivace 3T3-L1 Myší embryonální fibroblasty 3T3-L1 se kultivují nejčastěji v Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) obohaceném o 10 % fetálního bovinního séra (FBS) či 10 % telecího séra (CS) a přídavkem 4 mM glutaminu. Podmínky pro kultivaci zahrnují 5% atmosféru CO2 a teplotu 37 ºC.
Diferenciace 3T3-L1 preadipocytů v adipocyty Po dosažení konfluence je k buňkám přidán "růstový koktejl" skládající se z dexamethasonu, isobutylmethylxanthinu a insulinu. Tyto složky působí jako induktory adipogeneze neboli diferenciace preadipocytů v adipocyty. Jeden z možných způsobů kvantifikace produkce TAG buňkami je obarvení konfluentních klonů barvivem Oil Red O, následně dané barvivo vyvázat 100% isopropanolem a měřit absorbanci při 500 nm.
Využití buněčné linie 3T3-L1 Využití buněčné linie 3T3-L1 preadipocytů je velice rozmanité. Pro jejich schopnost aktivace enzymů podílejících se na syntéze mastných kyselin a TAG se využívají k testování léků, které mají efekt na akumulaci tuků v buňkách. Využívají se též pro výzkum v oblasti působení oxidativního stresu, obesity, diabetu a rakoviny.
Odkazy
Reference
Externí odkazy
Kategorie:Buněčné kultury