L'agglutination mixte ou coagglutination des globules rouges est un test de laboratoire utilisé dès les années 1950, initialement en microbiologie puis en immuno-hématologie.

Présentation Dans ce test, l'agglutination, témoin d'une réaction antigène-anticorps spécifique, implique deux composantes qui peuvent être des particules inertes, des bactéries ou des globules rouges. Dans ses applications immuno-hématologiques, l'agglutination des globules rouges porteurs d'un antigène donné (cellules tests) est provoquée par un anticorps spécifique de cet antigène. Cet anticorps, au lieu d'être libre dans un réactif liquide (comme lors des groupages sanguins) est fixé sur d'autres cellules porteuses du même antigène (cellules supports), sans pouvoir les agglutiner spontanément.

En 1955-1956, Coombs et al. ont ainsi démontré la présence des antigènes A et B sur les plaquettes ou les cellules épidermiques humaines à l'aide des globules rougesCoombs R.R.A. et al. : The A and B antigens on human platelets demonstrated by means of mixed erythrocyte-platelet agglutination. Vox Sang., 5, 111, 1955.Coombs R.A.A. Et al. A and B blood group antigens on human epidermal cells demonstrated by mixed agglutination. Lancet 1, 461, 1956.. Le caractère spécifique de la réaction est illustré par le Tableau 1.

Ce principe a été appliqué en 1973 par Lalezari à son circuit automatique d'agglutination en flux continu, utilisant les globules rouges à la fois en tant que cellules tests et cellules supportsLalezari P. : Direct determination of red blood cell bound antibody specificity. Brit.J. Haemat. 24, 777, 1973.. En 1975, Habibi et al. ont élargi cette application à d'autres méthodes d'hémagglutination en flux continu Habibi B. et al : A papain-bromelin-polybrene four channel autoanalyzer system for blood group antibody screening.Analysis of 22912 sera. Vox Sang. 25, 289, 1973. et précisé les mécanismes techniques nécessaires à l'étude des anticorps et antigènes érythrocytairesHabibi B. et al :Coagglutination en flux continu, techniques et applications. Rev. Franç.Transf. Immuno-hématol. 18, 1, 59-78, 1975..

Mécanismes

Deux phénomènes conjoints expliquent la coagglutination : Le transfert des molécules d'anticorps par proximité depuis les cellules supports où leur concentration est forte (sites antigéniques saturés) vers les cellules tests où cette concentration est nulle (sites antigéniques vacants). Le pontage entre les deux protagonistes test et support (à condition qu'ils partagent la même spécificité antigénique), provoqué par l'anticorps, spontanément non agglutinant, dont un des sites fixant l'antigène est libre et spécifique de cet antigène commun.

Avantages

Cette méthode présente plusieurs intérêts majeurs, tant sur les plan économique que technique :

L'économie de réactif : L'utilisation des globules rouges (GR) supports recouverts d'anticorps à la place d'anticorps en phase liquide réduit considérablement la consommation de celui-ci lors des groupages sanguins. La possibilité d'utiliser des mélanges d'anticorps au lieu d'anticorps purifiés : En sélectionnant les GR supports ayant une composition antigénique adaptée, ceux-ci tamiseront le mélange en ne fixant qu'une de ses spécificités. Les autres, non fixées, sont éliminées par simple lavage. Par exemple, un mélange d'anticorps anti-A, anti-B, anti-C et anti-D, fixé sur des GR supports porteurs de l'antigène D à l'exclusion des antigènes A, B et C deviendra un réactif anti-D monospécifique. La détermination directe de la spécificité des auto-anticorps : Dans les anémies hémolytiques auto-immunes où les anticorps recouvrent in vivo la surface des GR, ce test rend inutiles les procédés d'élution qui peuvent s'avérer laborieux ou peu efficaces.

+ Tableau 1 - Résultat et spécificité des réactions Profil des GR tests Test Anti-D Test Anti-C Libres Sur supports D+ Libres Sur supports C+ D+ C- ++ +++ -- -- D- C+ -- -- ++ +++ D+ C+ ++ +++ ++ +++ D- C- -- -- -- --

Légende : ++ : Agglutination classique (réactif liquide) +++ : Coagglutination (réactif sur support) -- : Pas de réaction GR : Globules rouges D+/C+ : Présence de l'antigène D-/C- : Absence de l'antigène

Références et notes

Catégorie:Hémostase et coagulation