Il Gran Premio Industria e Artigianato 2000, trentaquattresima edizione della corsa e ventiquattresima con questa denominazione, si svolse il 29 aprile su un percorso di 200 km, con partenza e arrivo a Larciano. Fu vinto dall'italiano Danilo Di Luca della Cantina Tollo davanti ai suoi connazionali Sergio Barbero e Nicola Miceli.

Ordine d'arrivo (Top 10) +CorridoreSquadraTempo1 Danilo Di Luca Cantina Tollo 4h58'00"2 Sergio Barbero Lampre-Daikin s.t.3 Nicola Miceli Alessio s.t.4 Serhij Hončar Liquigas-Pata s.t.5 Francesco Casagrande Vini Caldirola-Sidermec s.t.6 Vladimir Duma Ceramica Panaria-Gaerne a 10"7 Roberto Sgambelluri Cantina Tollo s.t.8 Pietro Caucchioli Amica Chips-Tacconi Sport s.t.9 Ruslan Ivanov Amica Chips-Tacconi Sport s.t.10 Paolo Bettini Mapei-Quick Step s.t.

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