Тимоловая проба (тимол-вероналовая проба, тимоловероналовая проба, , также проба Маклагана) — исторический неспецифический биохимический тест, относящийся к коллоидным (осадочным, флоккуляционным) пробам сыворотки крови. При проведении пробы сыворотку крови смешивают с насыщенным раствором тимола в барбитальном (вероналовом) буфере и оценивают возникающее помутнение.
Проба была предложена британским биохимиком Н. Ф. Маклаганом в 1944 году и в середине XX века широко использовалась как один из так называемых функциональных тестов печени, особенно при диагностике гепатитов. Однако проба не является прямым измерением белково-синтетической функции печени: её результат зависит от изменений состава и взаимодействия сывороточных белков и липопротеинов. Из-за низкой специфичности и небольшой дополнительной диагностической ценности с 1970-х годов её применение в рутинной диагностике стало сокращаться. В современные стандартные наборы биохимических исследований печени тимоловая проба обычно не входит.
История Маклаган описал пробу в 1944 году после наблюдения, что добавленный к барбитальному буферу тимол вызывает выраженное помутнение при смешивании с сывороткой некоторых пациентов с паренхиматозными заболеваниями печени. Первоначально реакцию сравнивали с другими применявшимися в то время коллоидными пробами, включая реакцию с коллоидным золотом.
В 1946 году Роберт Шенк и Чарльз Хогланд предложили количественную модификацию метода. В ней 0,05 мл сыворотки добавляли к 3 мл насыщенного тимолом барбитального буфера, а через 30 минут измеряли мутность фотометрически при длине волны 650 нм. Для стандартизации использовали суспензии сульфата бария.
В исследовании Шенка и Хогланда значения у 46 здоровых испытуемых составляли от 0 до 4,7 условной единицы при среднем значении 2,66 единицы. В дальнейшем применялись различные варианты методики и калибровки, поэтому приводимое в справочной литературе верхнее референсное значение около 4—5 единиц не является универсальным для всех вариантов теста.
Принцип метода При добавлении сыворотки к насыщенному тимолом буферному раствору образуются комплексы сывороточных белков и липидных компонентов, вызывающие рассеяние света и видимое помутнение. Исследования 1940-х годов показали важную роль γ-глобулинов и β-липопротеинов в развитии реакции, тогда как альбумин способен подавлять её.
Таким образом, повышенное значение тимоловой пробы не отражает изменение концентрации какого-либо одного белка и не может рассматриваться как непосредственное измерение синтеза белков печенью. На результат влияют соотношение различных белковых и липопротеиновых фракций, а также технические условия проведения реакции. В частности, величина помутнения чувствительна к pH и температуре реагента; липемия также способна увеличивать мутность в некоторых вариантах метода.
Диагностическое значение Исторически положительную тимоловую пробу связывали прежде всего с заболеваниями, сопровождающимися изменениями белкового состава сыворотки. В исследованиях 1940-х годов она часто была положительной при остром инфекционном гепатите и хронических гепатитах, тогда как при неосложнённой обструкции желчных путей положительная реакция встречалась значительно реже. Повышенные значения описывались также при циррозе и некоторых заболеваниях, не связанных непосредственно с печенью, что ограничивало специфичность теста.
Степень повышения тимоловой пробы плохо соответствовала тяжести поражения печени. Уже в ранних исследованиях было показано, что при остром гепатите результат мог оставаться повышенным длительное время после исчезновения других признаков заболевания.
Из-за неспецифичности положительная тимоловая проба сама по себе не позволяет установить причину заболевания печени или отличить заболевание печени от некоторых внепечёночных состояний. В исследовании 1974 года, включавшем 2557 серий печёночных лабораторных тестов, тимоловая проба не выявила случаев, в которых заболевание печени было бы диагностировано или исключено исключительно благодаря её результату. В сравнительном исследовании 1978 года при 13 распространённых гепатобилиарных заболеваниях тимоловая проба обладала одной из самых низких дискриминационных способностей среди исследованных лабораторных показателей; исключение её из набора тестов приводило лишь к незначительной или отсутствующей потере диагностической информации.
Поэтому старые указания на определённую долю «положительных» результатов при отдельных заболеваниях — например, о 90 % случаев гепатита или преимущественно отрицательной реакции при механической желтухе — отражают данные исследований середины XX века и не рассматриваются как современные показатели чувствительности и специфичности диагностического теста.
Современное применение В современной лабораторной диагностике повреждение и функцию печени оценивают преимущественно с помощью аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), щелочной фосфатазы, билирубина, альбумина и протромбинового времени или международного нормализованного отношения (МНО). АЛТ и АСТ используются преимущественно как показатели повреждения гепатоцитов, щелочная фосфатаза — как один из показателей холестаза, тогда как альбумин и протромбиновое время/МНО в большей степени отражают синтетическую функцию печени.
Тимоловая проба в современные рекомендации по стандартной оценке биохимических показателей печени не входит и имеет преимущественно историческое значение.
См. также Биохимический анализ крови Альбумин Электрофорез белков Гамма-глобулины
Примечания
Категория:Исследование крови Категория:Гепатология